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ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

更新時間(jian):2024-03-27

簡要描述:

脂質體(ti)(ti)包括的(de)氯膦酸二鈉脂質體(ti)(ti)和PBS,用(yong)于小鼠等動物體(ti)(ti)外或者體(ti)(ti)外清除(chu)單核巨噬細胞。ClodronateLiposomes巨噬細胞清除(chu)套裝。

ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

品牌 LIPOSOMA 貨號 CP-005-005
規格 5ml+5ml 供貨周期 現貨
主要用途

ClodronateLiposomes(氯(lv)膦酸二鈉脂(zhi)質(zhi)體+PBS對照(zhao)脂(zhi)質(zhi)體)

應用領域 生物科研,醫學研究,

產品簡介:

清除巨(ju)噬(shi)細胞(bao)(depletion of macrophages)是研究(jiu)巨(ju)噬(shi)細胞(bao)功能的(de)(de)重要方法。荷(he)蘭阿姆(mu)斯特(te)(te)丹Vrije University 的(de)(de)Nico van Rooijen教授(shou)開(kai)發的(de)(de)一款Clodronate Liposomes,可以利用巨(ju)噬(shi)細胞(bao)的(de)(de)內吞機制,將脂質體包裹的(de)(de)膜(mo)不通透性(xing)的(de)(de)氯磷(lin)酸(suan)(clodronate)帶入細胞(bao)內,利用“特(te)(te)洛伊木馬機制”從而達到去除巨(ju)噬(shi)細胞(bao)的(de)(de)目(mu)的(de)(de)。

作用原理:

兩親性磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)分(fen)子(zi)在(zai)水(shui)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)可(ke)(ke)以形成(cheng)同心圓形式的磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)雙分(fen)子(zi)層(ceng)球體(ti)(ti)(ti),磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)雙分(fen)子(zi)層(ceng)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)間(jian)通過水(shui)相(xiang)(xiang)分(fen)隔。溶解在(zai)水(shui)溶液中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)的氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)在(zai)形成(cheng)脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)(ti)(ti)的過程(cheng)(cheng)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)被(bei)包(bao)裹(guo)進磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)雙分(fen)子(zi)層(ceng)之(zhi)間(jian)的水(shui)相(xiang)(xiang)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)(如圖1)。游離的氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)不(bu)能(neng)自由的通過脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)(ti)(ti)的磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)雙分(fen)子(zi)層(ceng)。隨著脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)(ti)(ti)被(bei)巨噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)吞噬(shi)(shi),在(zai)巨噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)溶酶(mei)體(ti)(ti)(ti)磷(lin)(lin)(lin)酸(suan)酶(mei)的作用下,溶解在(zai)脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)(ti)(ti)水(shui)相(xiang)(xiang)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)的氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)就可(ke)(ke)以被(bei)逐步釋放(fang)出來,并(bing)累積在(zai)細(xi)胞(bao)(bao)內,當(dang)其達(da)到一定濃度時,巨噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)將會受(shou)到不(bu)可(ke)(ke)逆轉的損傷(shang),從而進入凋亡(wang)過程(cheng)(cheng)。從死亡(wang)的巨噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)釋放(fang)出來的氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)在(zai)細(xi)胞(bao)(bao)外的半衰期極短(大約15min),可(ke)(ke)以通過泌尿系統(tong)排除(chu)體(ti)(ti)(ti)外。

CLODRONATE LIPOSOMES & CONTROL LIPOSOMES (PBS)

氯膦酸鹽脂(zhi)質(zhi)體(ti)和對照脂(zhi)質(zhi)體(ti)(PBS)

SKU: CP-005-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposomes脂質體CP-005-005構成:

氯膦酸鹽脂質體:

由同(tong)心(xin)磷脂雙層構(gou)成(cheng)(cheng)的(de)(de)(de)人造球,該雙層包裹著(zhu)含有氯(lv)膦酸鹽(yan)的(de)(de)(de)PBS(磷酸鹽(yan)緩沖液)水溶液。脂質體是顆粒,大小大。3微米。它們在(zai)PBS中(zhong)形(xing)成(cheng)(cheng)懸(xuan)浮(fu)液,在(zai)儲(chu)存(cun)時(shi)會(hui)沉淀(dian),在(zai)試管或燒瓶(ping)的(de)(de)(de)底部形(xing)成(cheng)(cheng)沉淀(dian)。在(zai)對實驗動物給(gei)藥之前,應先搖(yao)晃懸(xuan)浮(fu)液,以回收均勻的(de)(de)(de)懸(xuan)浮(fu)液。

對照脂質體(PBS):

對照(zhao)脂(zhi)質(zhi)體不含氯(lv)膦酸鹽。它們僅含有PBS,可(ke)用于對照(zhao)實驗,以查(cha)明注射氯(lv)膦酸鹽脂(zhi)質(zhi)體后(hou)觀察(cha)到(dao)的效果是否僅是由于巨噬細胞耗竭所(suo)致。

clodronateliposomes脂質體CP-005-005產品(pin)描述

磷(lin)脂(zhi)雙層由磷(lin)脂(zhi)酰膽堿和膽固醇組成。將所(suo)有(you)脂(zhi)質體制(zhi)劑懸(xuan)浮在無菌磷(lin)酸鹽緩沖鹽水(PBS)中(zhong):

– 10 mM的Na2HPO4;

– 10毫(hao)米NaH2PO4;

– 140毫(hao)米氯(lv)化鈉(na)。

 

我(wo)們所有(you)的脂質(zhi)體(ti)均(jun)帶負電荷,因此不(bu)會一起阻塞。懸浮(fu)液中的脂質(zhi)體(ti)沒有(you)大(da)小(xiao),這意味著(zhu)它也包含越(yue)來(lai)越(yue)大(da)的脂質(zhi)體(ti)(大(da)3微(wei)(wei)米)。平(ping)均(jun)而言(yan),脂質(zhi)體(ti)的大(da)小(xiao)為1.7微(wei)(wei)米。

氯(lv)膦(lin)酸鹽(yan)脂(zhi)質體:人工制備的(de)脂(zhi)質囊(nang)泡的(de)懸浮液,包裹了氯(lv)膦(lin)酸鹽(yan)。懸浮液中氯(lv)膦(lin)酸鹽(yan)的(de)濃度約為。5毫克(ke)/毫升 氯(lv)膦(lin)酸鹽(yan)以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的(de)形(xing)式(shi)封(feng)裝在脂(zhi)質體囊(nang)泡中。

PBS脂質(zhi)體:人工制備(bei)的脂質(zhi)囊泡的懸浮液,其(qi)中包(bao)裹了PBS水溶液。這些不含氯膦酸鹽(yan),可用于(yu)對照(zhao)實驗。

熒光DiI脂質體(ti):人工制備(bei)的(de)脂質囊泡的(de)懸浮液(ye)(ye),其中包封(feng)了(le)PBS水溶液(ye)(ye),并(bing)用熒光染(ran)料DiI標記。它們不含氯(lv)膦(lin)酸鹽,可(ke)用于研究通(tong)過特定(ding)給藥途徑注射(she)的(de)脂質體(ti)是(shi)否能(neng)夠到達要研究的(de)巨噬(shi)細胞。

 

儲存和使(shi)用(yong)說明

到達脂質體后(hou),應(ying)將其儲存在4 – 8ºC(或(huo)39 – 47ºF)之間。脂質體懸浮液不得冷(leng)凍,也(ye)不要暴露(lu)于高溫下。這可能會對磷(lin)脂雙層造成干擾,可能導致氯膦酸鹽從(cong)脂質體中泄漏出來(lai)。

給藥(yao)前,首先使(shi)脂(zhi)質(zhi)體達到(dao)室溫,然后(hou)輕輕搖(yao)動或攪拌懸浮液。一(yi)段時間后(hou),脂(zhi)質(zhi)體易于沉淀,導(dao)致(zhi)小瓶中的(de)分布(bu)不(bu)(bu)均勻。當注(zhu)射(she)(she)(she)花費(fei)太多時間時,脂(zhi)質(zhi)體甚至可能在注(zhu)射(she)(she)(she)器中沉淀。如果使(shi)用同(tong)(tong)一(yi)注(zhu)射(she)(she)(she)器注(zhu)射(she)(she)(she)多只動物(wu),可能會導(dao)致(zhi)劑量不(bu)(bu)同(tong)(tong)。

不建議稀(xi)釋懸(xuan)浮液,但(dan)如有必(bi)要,請使(shi)用PBS或鹽水。

我們建(jian)議(yi)客戶在(zai)發貨后16周內使用脂質體制劑。強(qiang)烈(lie)建(jian)議(yi)不要在(zai)到期日期之后使用。在(zai)此期間之后,污(wu)染(ran)的(de)風(feng)險會增加,并且可能會發生輕微(wei)的(de)功(gong)能喪失。

作(zuo)用機理

巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)在免(mian)疫(yi)和(he)(he)非免(mian)疫(yi)防御機制中起重要(yao)(yao)作(zuo)用(yong)。它(ta)們是抵御滲透到(dao)脊(ji)椎動物(wu)體內的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)菌,病(bing)毒(du)和(he)(he)其他形式的(de)(de)(de)(de)微生物(wu)污染的(de)(de)(de)(de)首(shou)道防線。巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)是大型細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),幾乎存在于所有(you)身體組織中,它(ta)們可(ke)(ke)以具有(you)不(bu)同的(de)(de)(de)(de)形式和(he)(he)名稱(cheng)(例如(ru)(ru)庫普弗細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),肺泡巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),小膠質細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),破(po)骨細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),紅髓巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao))。巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)“清除(chu)”,它(ta)們攝(she)入并(bing)消(xiao)化可(ke)(ke)能(neng)是潛在病(bing)原體的(de)(de)(de)(de)所有(you)異(yi)物(wu),微生物(wu),癌細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)和(he)(he)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)碎片。該過程稱(cheng)為(wei)吞噬(shi)(shi)作(zuo)用(yong)。巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)主(zhu)要(yao)(yao)通過可(ke)(ke)溶性分子(zi)如(ru)(ru)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)因子(zi)和(he)(he)趨化因子(zi)的(de)(de)(de)(de)介導(dao)來進一步調節許多非吞噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)功(gong)能(neng)。他們參與先天(tian)免(mian)疫(yi),

脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)是人工制備的(de)球體(ti),由同(tong)心磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)(shuang)層組成。當磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)分(fen)(fen)(fen)散在水(shui)(shui)中時(shi),親水(shui)(shui)性頭部(bu)將(jiang)構成脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)的(de)兩個外(wai)部(bu)部(bu)分(fen)(fen)(fen),而疏水(shui)(shui)性脂(zhi)(zhi)(zhi)肪酸(suan)基(ji)團將(jiang)構成內部(bu)部(bu)分(fen)(fen)(fen)(見圖1)。水(shui)(shui)室分(fen)(fen)(fen)隔雙(shuang)(shuang)層,親水(shui)(shui)分(fen)(fen)(fen)子(zi)可以溶(rong)解(jie)在其中,形(xing)成脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)包封的(de)分(fen)(fen)(fen)子(zi)。氯膦(lin)酸(suan)鹽(二氯亞甲基(ji)雙(shuang)(shuang)膦(lin)酸(suan)酯或Cl2MBP)是一種親水(shui)(shui)性分(fen)(fen)(fen)子(zi),可以封裝在磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)(shuang)層中。游離(li)氯膦(lin)酸(suan)鹽不易(yi)穿過細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜,并(bing)通過腎臟系(xi)統(tong)從(cong)循環中迅速清除(即數分(fen)(fen)(fen)鐘內)。但是,氯膦(lin)酸(suan)鹽脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)包埋(mai)在脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)中時(shi),會被巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)吞(tun)噬(shi)(shi)(shi),無(wu)法逃(tao)脫(見圖2)。磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)(shuang)層被溶(rong)酶體(ti)磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)酶消化,而氯膦(lin)酸(suan)鹽未(wei)被消化并(bing)且(qie)保留在巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)中。巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)攝入的(de)磷(lin)(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)(shuang)層和脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)越多,在巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)內積累的(de)氯膦(lin)酸(suan)鹽越多。超過一定的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)內濃度,氯膦(lin)酸(suan)鹽將(jiang)通過啟(qi)動(dong)程(cheng)序性細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)死亡(wang)(即凋亡(wang))來消除巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。

機制氯膦酸鹽脂質體

圖(tu)1.氯膦(lin)酸鹽脂(zhi)質體的示意(yi)圖(tu)。囊泡由同心的磷脂(zhi)雙(shuang)層構成,被水(shui)性隔(ge)室隔(ge)開。雙(shuang)層由親水(shui)和疏水(shui)基(ji)團組成。將氯膦(lin)酸鹽(在(zai)此以黑色方塊表(biao)示)溶解(jie)在(zai)水(shui)溶液中并封裝在(zai)脂(zhi)質體內(nei)。

 

氯膦酸鹽脂質體通過巨噬細胞攝取和消化的示意圖。

圖2.巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞對氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽脂(zhi)質體的(de)攝(she)取和消化示意(yi)圖。巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞通過(guo)胞吞作(zuo)用攝(she)入氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽脂(zhi)質體,然后與(yu)含有(you)磷脂(zhi)酶(mei)的(de)溶酶(mei)體(L)融合(he)(箭(jian)頭)。磷脂(zhi)酶(mei)破壞的(de)磷脂(zhi)雙層越多,在巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞內釋放的(de)氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(黑色方塊)越多。巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞終(zhong)通過(guo)凋亡被殺死。(N =巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞核)。

因此(ci),氯(lv)膦酸鹽脂質(zhi)體(ti)可用于通過消耗(hao)巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞來研究巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞功能。例如(ru),它(ta)們可以(yi)應用于各種自身(shen)免疫(yi)性疾(ji)(ji)病,移(yi)植,神經系統(tong)疾(ji)(ji)病和基因治療(liao)的(de)模型(xing)。氯(lv)膦酸鹽脂質(zhi)體(ti)只有(you)在(zai)可以(yi)達(da)到的(de)情況下才能耗(hao)盡巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞。一些組(zu)(zu)織(zhi)可以(yi)形成(cheng)脂質(zhi)體(ti)的(de)屏(ping)障。通過選擇氯(lv)膦酸鹽脂質(zhi)體(ti)的(de)正確給藥(yao)途徑,可以(yi)耗(hao)盡特定的(de)器官或組(zu)(zu)織(zhi)的(de)巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞。有(you)關管理協議(yi)的(de)更多信息,請(qing)單(dan)擊(ji)此(ci)處。

 

PBS脂質(zhi)體主要(yao)用于對照實驗。但是(shi),這些也可以在(zai)某些時間段內通過飽和來阻止吞(tun)噬(shi)作用。因此,PBS脂質(zhi)體不能(neng)代表正常健康的,未(wei)阻斷的,未(wei)抑(yi)制的和未(wei)活化的巨(ju)噬(shi)細胞的對照實驗。當(dang)比較(jiao)氯膦(lin)酸(suan)鹽脂質(zhi)體和PBS脂質(zhi)體的作用時,其作用因此可能(neng)小于預期。

有(you)關更(geng)多(duo)信息,請參見:

– Van Rooijen,N.和(he)Sanders,A.(1994)。脂(zhi)質(zhi)體介導的巨噬細(xi)胞耗竭:作用機(ji)理,脂(zhi)質(zhi)體制備和(he)應用。免疫學雜志(zhi),174(1-2),83-93。

– Van Rooijen,N.,Sanders,A.和van den Berg,TK(1996)。脂質體介導的氯(lv)膦酸鹽和丙am的細胞內(nei)遞送誘導的巨噬細胞凋亡。免疫(yi)學雜志,193(1),93-99。

 

ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

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